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[生技工程] 浅析小鼠宫颈癌细胞——U14 细胞的作用

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发表于 2019-11-4 09:23:47 | 显示全部楼层 |阅读模式

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宫颈癌是女性常见的一种恶性肿瘤,目前对于宫颈癌的治疗手段有手术、放疗、化疗等方法,如化疗药物在杀灭肿瘤的同时对生长活跃的体内正常细胞也有不同程度的毒性,寻找毒副作用小、疗效显著的药物对宫颈癌的治疗具有重要意义。构建小鼠宫颈癌模型是进行高效、低毒的抗肿瘤药物筛选常用的方法。U14细胞是一种可以构建小鼠宫颈癌模型的细胞,其分化具有持久性、稳定性、不可逆性和普遍性的特点。U14细胞可以用于构建小鼠宫颈癌模型,并探索药物的抗肿瘤的作用,为抗肿瘤药物的研发提供重要的研究基础。

1、构建宫颈癌模型

U14细胞株可以构建小鼠宫颈癌模型,如有研究者将U14 宫颈癌细胞株从液氮中取出,水浴融化,离心,弃去上清液,台盼蓝染色计数活细胞率超过95%时,将细胞调整为1*10^7/ml,取0.3ml U14 细胞接种到小鼠腹腔内[1]。在小鼠体内传代10d,无菌条件下取小鼠体内U14 细胞,实体瘤模型取0.2ml(2*10^6/ml)接种到小鼠右前肢腋下,腹水瘤模型取0.2ml细胞注射到腹腔内,接种成功率为100%

建立肿瘤动物模型是研究人类肿瘤和研发抗肿瘤药物的重要方法,美迪西根据客户的需求提供各种有效的动物模型,用来检测药物的有效性。实验动物有非人类灵长动物、狗、小鼠、大鼠、家兔、豚鼠、裸鼠等各种种类。目前,已经建立多个有效动物肿瘤模型,并经过多方验证和长期实践考验。

还有研究者采用两种方法建立BALB/c小鼠宫颈癌原位瘤模型,以PTD4-apoptin融合蛋白进行21天的短期治疗。TUNEL检测PTD4-apoptin融合蛋白的促凋亡效应,HE染色评估肿瘤的形态学变化。结果发现与异体异位宫颈癌组织移植法相比,宫颈注射U14宫颈癌细胞悬液的成瘤效果更好。原位瘤给予PTD4-apoptin融合蛋白可显著抑制肿瘤生长,促进肿瘤细胞的凋亡。

2、研究药物的抗肿瘤作用

通过U14细胞株构建小鼠宫颈癌模型,还可以发现药物对模型鼠宫颈癌肿瘤生长的质量和体积影响,探索药物抑制小鼠移植U14 宫颈癌的机制,有助于研发有效、低毒的抗肿瘤药物。

如有研究者为了研究咖啡酸锗对小鼠U14瘤的抑制作用及其细胞凋亡机制,试验采用MG-P染色、透射电镜和免疫组化方法观察了U14瘤细胞的凋亡及瘤细胞中BaxBcl-2蛋白表达情况[2]。结果表明MGP染色及透射电镜观察可见,咖啡酸锗试验组出现较多的凋亡细胞,可见典型的细胞凋亡形态特征;免疫组化试验显示,咖啡酸锗各剂量组能下调Bcl-2蛋白表达(P<005),上调Bax蛋白表达(P<001P<005)。说明咖啡酸锗能抑制小鼠U14瘤的生长,并能诱导U14瘤细胞凋亡,这可能是其发挥抗肿瘤作用的主要机制之一。

虽然利用U14细胞株可以构建小鼠宫颈癌模型进行抗肿瘤药物的研发,但需要注意的仅仅选一种菌株进行药物筛选可能会出现漏筛,因为该种药物不一定对各种类型移植性肿瘤都有效。还需要注意的是动物肿瘤的生物学特点与人类肿瘤有较大差别,对动物肿瘤生长有抑制作用的药物未必对人类肿瘤有效。

[1]皂刺粗黄酮对小鼠移植U14 宫颈癌细胞生长的影响及机制[J]

[2]咖啡酸锗对小鼠U14瘤的抑制作用及细胞凋亡机制的研究[J]

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